Bacteriología

lunes, 10 de junio de 2013

BACTERIAS PRODUCTORAS DE NEUROTOXINAS

EQUIPO #1
CASTRO CASTILLO DANIELA GUADALUPE
CATETE QUIÑONEZ HUGO ADRIAN
DURAN VAZQUEZ SANJUANITA
FLORES VERONICA ANAHI
IZAGUIRRE CERDA CECILIA MARIELA
MARTINEZ LEAL JAQUELINE
MARTINEZ URBINA JOHANNA HARIM
PEREZ VEGA MIRIAM CRISTEL

PROFESOR: Q.F.B. JAIME HINOJOSA
CBTiS 7
4-B

¿QUE SON LAS NEUROTOXINAS?

Se denomina neurotoxina a toda sustancia capaz de alterar el funcionamiento del sistema nervioso, lo cual aleja al individuo de su estado homeostático y pone en riesgo su vida. Las alteraciones pueden ser a nivel fisiológico, morfológico o manifestarse en cambios de comportamiento.

Existen neurotoxinas de origen animal, vegetal o creadas por humanos (sintéticas químicas). Sus efectos dependen de la dosis y de la vía de exposición. Pueden ser temporales o permanentes e incluso propiciar la muerte.

Muchos microorganismos son capaces de generar neurotoxinas. Por ejemplo, la toxina que libera el agente Clostridium tetani es capaz de unirse a receptores sinápticos de las motoneuronas efectoras, lo cual provoca despolarización en las neuronas, que terminan suscitando una serie de contracciones musculares de carácter convulsivo. A esta enfermedad se le conoce como tétanos. Una manera de evitar este fenómeno es la administración de un toxoide antitetánico, el cual desencadena una respuesta inmune contra la neurotoxina.

BACTERIAS PRODUCTORAS DE NEUROTOXINAS:

Las Toxinas microbianas son toxinas producidas por microorganismos, incluyendo bacterias, virus y hongos. Las toxinas microbianas son determinantes importantes de la virulencia responsable de patogenicidad microbiana y/o evasión de la respuesta inmune del hospedador. Algunas toxinas bacterianas, tales como neurotoxinas las botulínicas, son las más potentes toxinas naturales conocidas. Sin embargo, las toxinas microbianas también tienen usos importantes en envestigación médica e investigación
Se denomina neurotoxina a toda sustancia capaz de alterar el funcionamiento del sistema nervioso, alejando al individuo de su estado homeostático y poniendo en riesgo su vida. Las alteraciones pueden ser a nivel fisiológico, morfológico o manifestarse en cambios de comportamiento.

Bacillus

Bacillus es un género de bacterias en forma de bastón y Gram positiva. El género Bacillus pertenece a la División Firmicutes. Sonaerobios estrictos o anaerobios facultativos. En condiciones estresantes forman una endospora de situación central, que no deforma la estructura de la célula a diferencia de las endoesporas clostridiales. Dicha forma esporulada es resistente a las altas temperaturas y a los desinfectantes químicos corrientes.
Bacillus cereus es una bacteria que causa envenenamiento por consumo, fue descubierta y erradicada por Sumin Lee.

Características generales
Bacilo Gram positivo, esporulado, aerobio o anaerobio facultativo, móvil. La espora es ovoidea, central y no deformante. Hidroliza la lecitina de la yema del huevo y no fermenta el manitol. Temperatura óptima 30°C a 37°C, su temperatura de crecimiento 5°C a 55°C y temperatura de germinación 5°C a 8°C. Su pH óptimo 4.5 a 9.3, Aw 0.95 y su concentración de sal 7.5%. Produce dos tipos de toxiinfecciones alimentarias: la forma diarreica y la forma emética.

Patogenicidad

Forma diarreica

Periodo de incubación de 8 a 16 horas, causa diarrea, dolor abdominal . El proceso dura 24 horas. Los principales alimentos en donde se puede encontrar son carnes y productos derivados del pollo, sopas deshidratadas, embutidos, especias, en los productos derivados de la vainilla, cereales, harinas, clara de huevo deshidratada, y color de durazno y piña.

Forma emética

Periodo de incubación de 1 a 5 horas, produce vómitos y náuseas, el proceso dura 24 horas. Poder patógeno Produce dos tipos de entero toxinas: toxinas termoestables y termolabiles lo que permite el crecimiento a temperaturas extremas y las variaciones de la mismas sin ocasionar desnaturalizacion de la bacteria.

Epidemiología

La epidemiología se puede aislar frecuentemente de alimentos naturales e industrializados, cuando se ingiere en cantidades pequeñas no produce complicaciones aparentes.

Se empezó a asociar a alimentos en los años 50, se recibieron noticias de gastroenteritis agudas en niños que se adjudicaron a Bacillus cereus en Virginia, en 1993. La intoxicación se relacionó con el consumo de arroz frito en dos centros de cuidado de niños.

Laboratorio Clínico
La búsqueda e identificación de B.cereus en el laboratorio clínico en los coprocultivos no es rutinaria. La incidencia de portadores sanos asintomáticos, en la población es frecuente, 14% de los adultos sanos tienen colonización transitoria gastrointestinal por lo tanto en las investigaciones de un brote los aislamientos cualitativos son insuficientes. Por este motivo, el análisis del alimento es de fundamental importancia para poder confirmar el agente etiológico. El aislamiento de un número significativo de unidades formadoras de colonias en el alimento y la recuperación de la misma cepa ( identificada por serovariedad, fagos, plásmidos, etc.) en las muestras clínicas (heces) de los pacientes durante la fase aguda de la enfermedad dan la confirmación de que B.cereus está involucrado en el brote.

Prevención.
La principal medida es el manejo adecuado de los alimentos. Si los alimentos se preparan de modo que la temperatura se mantenga entre 30 y 50 grados se permite la proliferación vegetativa, cuando se las deja enfriar de forma lenta, las esporas se multiplican y elaboran la toxina.

Clostridium.

Los clostridios son bacilos grandes móviles, grampositivos y anaerobios, muchos descomponen proteínas, forman toxinas o ambas cosas. Su hábitat natural es el suelo o el intestino de los animales y el hombre, donde viven como saprófitos. Entre los patógenos se encuentran los causantes del botulismo, tétanos, gangrena gaseosa y colitis seudomembranosa.

Morfología e identificación.
Las esporas de clostridios tienen un diámetro mayor al de los bastoncillos en los cuales se forman. Casi todos los clostridios son móviles y poseen flagelos perítricos.

Cultivo.
Crecen solamente en condiciones de anaerobios, mediante el método de Gaspack o mediante medios líquidos en tubos de ensaye con tejidos de animales (carne picada).

Forma de las colonias.
Algunos microorganismos producen colonias grandes, elevadas, con bordes enteros, otros producen colonias más pequeñas, cuyos bordes se extienden en forma de red de finos filamentos. Muchos clostridios producen una zona de hemólisis en agar de sangre.

Características del crecimiento.
Los bacilos anaerobios son incapaces de utilizar el oxígeno como aceptor final de hidrógeno; carecen de citocromo y de citocromoooxidasa y son incapaces de destruir el peróxido de hidrógeno porque carecen de catalasa y peroxidasa. Pueden fermentar una variedad de azúcares; muchos digieren proteínas.

Características antigénicas.
Comparten antígenos, pero también poseen antígenos específicos solubles que permiten agruparlos por medio de pruebas de precipitación.

domingo, 28 de abril de 2013

TUBERCULOSIS (MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS)

¿QUE ES LA TUBERCULOSIS? Y ¿COMO SE TRANSMITE?

La tuberculosis es una enfermedad pulmonar contagiosa que se trasmite por el aire. Cuando las personas enfermas de tuberculosis tosen, estornudan, hablan o escupen, lanzan al aire microorganismos, conocidos como bacilos de la tuberculosis. Basta con inhalar unos pocos bacilos para resultar infectado. No obstante, no todas las personas infectadas con bacilos de la tuberculosis enferman. El sistema inmunitario mata los bacilos de la tuberculosis, o bien los “aísla”, pudiendo éstos mantenerse en estado latente durante años. Si el sistema inmunitario no logra controlar la infección por los bacilos de la tuberculosis, éstos se multiplican, produciendo la forma activa de la enfermedad y dañando al organismo. Si no recibe tratamiento, cada persona con tuberculosis infecciosa transmitirá los microorganismos patógenos a unas 10 a 15 personas cada año.

PATOGENIA

Cuando una persona inhala esas partículas suspendidas en el aire, lo suficientemente pequeñas como para llagar a los alvéolos, comienza la infección. Es difícil establecer cuántos bacilos se necesitan para producir infección, pero se estima que entre 5 y 200.

Una vez en los alvéolos, los bacilos son fagocitados por los macrófagos alveolares no activados (Estadio I de la patogenia), donde se multiplican y producen la liberación de citoquinas que, a su vez, atraerán a más macrófagos y monocitos que de nuevo fagocitarán los bacilos. Se produce una acumulación de monocitos y bacilos intracelulares (Estadio II o estado de simbiosis, también conocido como Fase de Crecimiento Logarítmico) entre los días 7 y 21. La posterior necrosis tisular y de los macrófagos (Necrosis caseosa, Estadio III) hace que se cree un medio desfavorable para la multiplicación de los bacilos. Esto se produce alrededor de la tercera semana, coincidiendo con la positivización del PPD.

El componente más importante es la pared, es una gran macromolécula que contiene contiene complejos lípidos solubles, estos representan del 30 al 60% de ella y entre ellos se incluye micosidos, glucolipidos Y esteres de trealosa. Tambien moléculas solubles en agua no lipidicas como el glucógeno, glucano, lipolisacaridos. Y proteínas (tuberculina).

La gran mayoría de los casos de tuberculosis están producidos por Mycobacterium tuberculosis, especie de la familia de Mycobacteriaceae, orden Actinomicetales. Junto con otras tres especies muy relacionadas, M. bovis, M. africanum y M. microti, forman el grupo de micobacterias tuberculosas (M. tuberculosis complex).

M. bovis es mucho menos frecuente. Se caracteriza por su resistencia uniforme a pirazinamida, aunque en los últimos años ha sido responsable de una epidemia en España de tuberculosis multirresistente asociada a enfermos VIH, pero con transmisión también a inmunocompetentes. M. africanum (se considera una forma intermedia entre las dos anteriores) es una rara causa de tuberculosis humana en África.

DIAGNOSTICO DE LA TUBERCULOSIS.

La TBC activa se diagnostica por la detección de Mycobacterium tuberculosis en cualquier muestra del tracto respiratorio (TBC pulmonar) o fuera de él (TBC extrapulmonar). Aunque algunos métodos más modernos (diagnóstico molecular) han sido desarrollados, la visión microscópica de bacilos ácido-alcohol resistentes (BAAR) y el cultivo en medio Löwenstein-Jensen siguen siendo el gold standar del diagnóstico de la TBC, especialmente en países con bajos recursos sanitarios, aunque últimamente el método MODS viene siendo validado dando resultados con una sensibilidad y especificidad superiores al cultivo. La microsocopía de BAAR es rápida y barata y un método muy eficiente para detectar pacientes contagiosos. El uso de cultivo en la TBC se realiza cuando hay poca carga bacteriana (mayor sensibilidad), para la identificación de la cepa y para el estudio de sensibilidades a los distintos tratamientos.Tanto la microscopia como el cultivo pueden usarse para monitorizar el tratamiento.

TRATAMIENTO

Los medicamentos de primera elección que son básicos en todo tratamiento contra la tuberculosis son:

-Isoniazida.

-Etambutol.

-Rifampicina.

-Pirazinamida.

Es muy complicado tratar y curar la tuberculosis resistente a los medicamentos. La tuberculosis resistente a los medicamentos debe ser tratada bajo la supervisión cercana de un experto en la enfermedad.

TUBERCULINA:

La tuberculina es un extracto de un cultivo líquido de M. tuberculosis. La Prueba se realiza mediante la reacción de Mantoux que consiste en una Inyección intradérmica en la cara anterior del antebrazo, de un derivado Proteico purificado de tuberculina (2 UT de PPD RT-23). La lectura se realiza a Las 48-72 horas midiendo el diámetro de la induración. Una prueba positiva (=>5 mm de induración) sugiere la presencia de una infección.

ESTADISTICAS DE LA TUBERCULOSIS EN REYNOSA

Reynosa • Pese a que la Jurisdicción Sanitaria Número 4 de Reynosa a partir de de este 2012, prescindió de los municipios de Río Bravo, Camargo y Díaz Ordaz, las estadísticas de tuberculosis se mantienen.

En lo que va del año, se lleva un registro de 61 casos, mientras que en el mismo periodo del 2011 se llevaba un total de 55. Al respecto, la directora del Centro Regional de Tuberculosis en esta localidad, Magín Pereda, señaló que para poder afirmar que se tiene una etapa de control, tendrá que transcurrir el primer semestre del año.

El exhorto a la población es para que tomen en cuenta los síntomas de este padecimiento, como son: tos clásica, fiebre durante la tarde noche, pérdida de peso y apetito, entre otros, esto con la intención de que inicien el tratamiento pertinente en tiempo y forma.

MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS.

Mycobacterium tuberculosis es una especie de bacteria patógena del género Mycobacterium y agente causante de la mayoría de los casos de la enfermedad Tuberculosis.

Descubierta en 1882 por Robert Koch, Mycobacterium tuberculosis tiene un revestimiento inusual en su superficie (principalmente de ácidos micólicos), lo que la hace inmune a la tinción de Gram, y recibe el nombre de bacteria acido/alcohol resistente.

Mycobacterium tuberculosis es altamente aeróbica y requiere de altos niveles de oxígeno por lo que se convierte en un patógeno de las vías respiratorias de mamíferos.

El genoma de Mycobacterium tuberculosis fue secuenciado en 1998.

Morfología:

El M. Tuberculosis es un bacilo en forma de bastoncillo de extremo redondeado. Es resistente al ácido y al alcohol Tiene una longitud de 1 a 4 micras, y de 0.3 a 0.6 micras de diámetro. Se comprueba con la técnica de tinción de ZIEHLNEELSEN o algunas de sus variantes debido a los componentes lipídico de su pared celular.

Esta bacteria es Gram positiva, aerobia. Su gran virulencia se debe a que puede vivir largo tiempo fuera del organismo (6 a 8 meses). Pero la exposición a la luz la destruye. Casi siempre es positiva la prueba de niacina y esto nos sirve para diferenciarla de otras bacterias. En condiciones óptimas de laboratorio las cepas de M. tuberculosis tardan en replicarse una sola vez aproximadamente en 18 horas. Las colonias se hacen visibles en un medio de LOWENSTEIN JENSEN; pueden aparecer después de 6 semanas.

PATOGENIA

El componente más importante es la pared, es una gran macromolécula que contiene complejos lipídicos solubles, estos representan del 30 al 60% de ella y entre ellos se incluye micósidos, glucolípidos y esteres de trealosa. También moléculas solubles en agua no lipidicas como el glucógeno, glucano, lipolisacaridos, y proteínas glucano, lipolisacaridos, y proteínas (tuberculina) (tuberculina)

TOMA DE MUESTRAS DE TUBERCULOSIS

Una buena muestra es aquella que proviene del sitio de la lesión, en cantidad suficiente, recolectada en un envase adecuado y conservado correctamente.

Localización pulmonar: EXPECTORACIÓN PULMONAR

Considerada la muestra ideal por su buen rendimiento la toma de muestra debe realizarse en un espacio ventilado de forma individual.

EXPECTORACIÓN INDUCIDA: En pacientes que no puedes producir una muestra espontanea o en niños, se puede inducir la expectoración por maniobras quinésicas o por nebulización laríngea.

**La muestra de expectoración se conserva hasta un máximo de 5 días, en un lugar fresco protegido de la luz.**

SECRECIÓN BRONCOALVEOLAR O LAVADO BRONCOALVEOLAR: Esta muestra se obtiene a través del procedimiento médico de fibrobroncoscopía, estas muestras deben procesarse precozmente, antes de las 12 hrs.

POR CONTENIDO GASTRICO

Destinado preferentemente a la investigación de tuberculosis pulmonar en niños. La indicación es la extracción de contenido gástrico después de un tiempo de 12 hrs.

También se encuentra la localización genital que es por biopsia de trompa, epidiohimo u otro tejido y sangre menstrual. Entre otras.

TINCIÓN DE BAAR

La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, que se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan bacilos ácido-alcohol resistentes o BAAR.

Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parásitos coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. La tinición fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes, Franz Ziehl (1859 to 1926), un bacteriólogo y Friedrich Neelsen (1854 to 1894), un patólogo.

PROCEDIMIENTO:

1. Montaje del esputo.

2. Coloración con fuchina.

3. Se flamea hasta que emita vapores tres veces.

4. Se lava con agua de la llave y luego se decolora con etanol decolora con etanol ácido clorhídrico y ácido ácido clorhidrico y se deja actuar durante 30 segundos para remover el colorante.

5. Se añade Azul de metileno y se deja actuar un minuto. (Colorante de actuar un minuto. (Colorante de contraste)

6. Lavar con agua.

CULTIVOS:

Los medios de cultivo pueden ser líquidos o
sólidos. Éstos a su vez se diferencian en que la
base sea agar (las diferentes variantes del
agar Middlebrook son las más utilizadas) o de
huevo (el medio L-J y el medio Coletsos son los
más utilizados).
La detección del crecimiento depende del tipo
de medios empleados. Con los medios sólidos
en base de huevo la detección se realiza
mediante la observación macroscópica 1 vez
por semana. Si utilizamos medios en base de
agar habrá que visualizarlos con el
microscopio (100 aumentos) 2-3 veces por
semana. Los medios en base de
agar cada vez son menos utilizados de forma
rutinaria ya que consumen mucho tiempo de
personal experimentado para poder leerlos y a
que la fundamental ventaja que antaño
tenían, que era la detección más precoz del
crecimiento, es menor desde la incorporación
de los medios líquidos.

Los medios líquidos son más sensibles que los
sólidos y además detectan el crecimiento más
precozmente.

SÍNTOMAS Y SIGNOS

No hay síntomas al principio, solo se limita a una tos mínima y poca fiebre, posteriormente aparece: Fatiga. Pérdida de peso. Tos sanguinolenta. Fiebre leve y sudoración nocturna. Fiebre leve y sudoración nocturna. Tos que produce flema. Los síntomas asociados con la enfermedad son: Los síntomas asociados con la enfermedad son: Sibilancia. Sudoración excesiva. Dolor en el tórax. Dificultad respiratoria.

PREVENCION

• Lucha contra el reservorio humano mediante el diagnostico precoz, tratamiento correcto y aislamiento de sujetos baciliferos en hospitales adecuados. • Luchar contra el reservorio animal mediante el control de rebaños, reacción tuberculina y vacunación sistemática • Vacunación • Quimioprofilaxis.

martes, 5 de marzo de 2013

Enterobacterias

Equipo: 1

Daniela Castro Castillo
Anahi Flores Veronica
Sanjuanita Duran Vazquez
Cecilia Izaguirre Cerda
Johana Martinez Urbina
Jaqueline Martinez Leal
Jael Morales Lugas
Cristel Perez Vega

Profesor: Q.F.B. Jaime Hinojosa

¿Qué son las Enterobacterias?

Las enterobacteriáceas (Enterobacteriaceae) son una familia de bacterias Gram negativas que contiene más de 30 géneros y más de 100 especies que pueden tener morfología de bacilos o cocos. Los miembros de esta familia forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y de otros órganos del ser humano y de otras especies animales. Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos. Sucumben con relativa facilidad a desinfectantes comunes, incluido el cloro. Con frecuencia se encuentran especies de Enterobacteriaceae en la bio-industria: para la fermentación de quesos y productos lácteos,alcoholes, tratamientos médicos, producción de toxinas en el uso de cosméticos, fabricación de agentes antivirales de la industria farmacéutica, etc.

Caracteristicas:

En la definición clásica de una Enterobacteriaceae se usan siete criterios básicos, adicional a la aparición de nuevos métodos taxonómicos para incluir a ciertos géneros que no cumplen con todos los siguientes criterios, pero que forman parte de esta familia:

Son bacterias gram negativas, la mayoría bacilos, otros cocobacilos y otros pleomórficos.

No son exigentes, son de fácil cultivo.

Son oxidasa negativo (excepto Plesiomonas, que es oxidasa positivo), es decir, carecen de la enzima citocromo oxidasa.

Son capaces de reducir nitrato en nitrito.

Son anaeróbicos facultativos.

Son fermentadores de carbohidratos en condiciones anaeróbicas con o sin la producción de gas (en especial glucosa y lactosa), y oxidadores de una amplia gama de substratos en condiciones aeróbicas.

Muchos géneros tienen un flagelo que sirve para desplazarse, aunque algunos géneros no son móviles.

Adicional a ello, las Enterobacteriaceae no forman esporas, algunas producen toxinas y pueden ser encapsuladas y son organismos catalasa positivos. Son quimioheterótrofos, y necesitan para su crecimiento compuestos simples de carbono y nitrógeno, generalmente sólo con D-glucosa, aunque algunas requieren aminoácidos y vitaminas. La temperatura óptima de crecimiento es de entre 22 °C y 37 °C.

Las diferencias entre los nombres de los diversos géneros provienen de criterios más precisos, como la fermentación de los diferentes azúcares, la producción o no de azufre, la presencia de enzimas metabólicas (β-galactosidasa, desaminasas, descarboxilasas), etc. Los serotipos de importancia medica y sanitaria pueden distinguirse entre sí por la presencia o ausencia de antígenos en su constitución celular, tales como en el lipopolisacárido (antígeno O), el antígeno flagelar (antígeno H) o el antígeno capsular (antígeno K).

Patología:

La presencia de Enterobacteriaceae dentro del organismo es anormal y determina la aparición de infecciones, cuya gravedad depende del punto de entrada. Introducidas por los alimentos, provocan problemas intestinales al adherirse y atravesar la barrera de la mucosa gastrointestinal, manifestada por diarreas y deshidratación. Ciertas especies provocan patologías específicas:

La especie Salmonella typhi es responsable de la fiebre tifoidea.
La especie Shigella dysenteriae es el agente responsable de la disentería bacilar.
La especie Escherichia coli enterotóxica es responsable de la gastroenteritis infantil.
La especie Yersinia pestis es responsable de la peste.
La especie Serratia marcescens usualmente causa infecciones nosocomiales como resultado de tratamiento en un hospital.

Las Enterobacteriaceae incluyen a organismos que resultan patógenos para el ser humano como la Escherichia coli o la Salmonella, especialmente importantes en la mortalidad infantil en países en desarrollo y patógenos para las plantas como Erwinia, en la mayor parte de los casos causando infecciones oportunistas. Todos los bacilos deEnterobacteriaceae son resistentes a antimicrobianos comunes, tales como la penicilina, la meticilina y la clindamicina, entre otros.

Métodos de identificación bacteriana:

es el ejercicio práctico en el que se ejercen las pruebas de identificación bacteriana. En la medicina general es común que llegue un paciente con síntomas de alguna infección bacteriana, el determinar un diagnóstico y poder interpretar qué bacteria causó la molestia al paciente es aventurado, pues hay muchas bacterias que causan las mismas enfermedades, por eso es conveniente realizar pruebas de identificación que son sumamente importantes para un buen diagnóstico de cualquier patología.

Cada género, inclusive especie, tiene diferentes reacciones cuando se les enfrentan diferentes reactivos, esto se hace a partir de un cultivo puro, ya la bacteria aislada, con estas pruebas podremos decir casi con exactitud de que género y qué especie es esta bacteria. A estas pruebas se les ha como primarias, secundarias y Complementarias.

Algunas pruebas:

Para la identificación de las bacterias en el laboratorio es importante conocer sus características morfológicas, la reacción a la tinción de Gram, agrupación, propiedades, morfología colonial, reacciones metabólicas como producción de enzimas y reacciones de óxido-fermentación.

La identificación bacteriana primaria se basa en los siguientes puntos:

Tinción de Gram: Revela la forma de la bacteria, agrupación y grupo taxonómico al que pertenece: Gram positivo o Gram negativo.
Tinción de Ziehl Neelsen: Las bacterias Alcohol-Ácido resistentes (BAAR), son difíciles de cultivar, tal vez y en un agar sangre muestre algo de crecimiento, por eso es útil esta tinción de identificación primaria.
Tinción de esporas: La espora es un mecanismo de defensa generalmente de los géneros Bacillus y Clostridium.
Prueba de catalasa: La catalasa es una enzima que descompone al peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua, esta enzima es similar a la estructura de la hemoglobina. Excluyendo al género Streptococcus y algunos otros la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas tienen catalasa.

La base de esta prueba es demostrar la presencia de la enzima catalasa, colocando 2 o 3 gotas al cultivo.

El resultado es positivo si en la colonia hay efervescencia.

Prueba de oxidasa: Básicamente es la detección de la enzima oxidasa, muy útil en la identificación de bacterias Gram (-). La reacción de la oxidasa se debe a la presencia del sistema de citocromo-oxidasa, la cual activa citocromos reducidos por oxígeno molecular, por la transferencia de un aceptor al estado terminal del sistema de transferencia de electrones.

Ácido de la Glucosa: La mayoría de las bacterias de interés médico usan la glucosa como fuente de carbono, como parte importante de su metabolismo. Se determina si la bacteria usa la glucosa produciendo ácido y/o gas a partir de dicho carbohidrato. En un tubo con agua peptonada al 1% tapado, y un tubo de Durham, se inocula la bacteria por agitación teniendo cuidado de no mover el tubo de Durham e incubándolo 24 horas y 37°C se obtienen los siguientes resultados.

Si la bacteria usa la glucosa producirá ácido y/o gas, por lo tanto el agua peptonada se observará rosa, si produce gas, se observará una burbuja en el tubo de Durham.

Prueba de O/F: para realizar esta prueba se usa el medio básico de Hugh y Leisfon con un pH de 7.1. Es un medio semisólido de color verde que se inocula por picadura, contiene carbohidratos como: glucosa, lactosa, sacarosa o maltosa al 10%. Como indicador de pH tiene Azul de bromotimol. Se usa en dos tubos, uno sin aceite y otro con acetie o vaselina sellándolo. Se inoculan los dos tubos con la bacteria por picadura y se mantiene a 37°C por 24 horas.
Prueba de Motilidad: Llamada también de la gota suspendida. Algunas bacterias son móviles por presentar flagelo, los flagelos son encontrados principalmente en las formas bacilares y pueden presentarse en número y posición variados(monotricos, peritricos, etc.). La base de esta prueba es determinar si la bacteria es móvil o inmóvil. Con un asa de inoculación se le coloca a un cubreobjetos un poco de muestra y se le agrega una gota de agua destilada. Se coloca sobre un portaobjetos y se observa al microscopio. Podremos observar si las bacterias tienen movimientos rectilíneos o curvos y en todas direcciones.

MEDIOS DE CULTIVO

1. Medios no selectivos: agar sangre

2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB

McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes

(no fermentan lactosa).

Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes

(no fermentan lactosa).

3. Medios altamente selectivos: SS agar, agar XLD, agar Hektoen entérico.
CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

1. Pruebas bioquímicas

2. Pruebas serológicas

3. Pruebas de biología molecular

Enterobacterias Representativas:

E. coli

Salmonella

Shigella

Yersinia enterocolitica

Yersinia pseudotuberculosis
Escherichia coli

Klebsiella pneumoniae

Proteus mirabilis

Proteus vulgaris

Enterobacter cloacae

Citrobacter freundii

Serratia marcescens

Morganella morganii

Providencia